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GIBCO原裝胎牛血清10270-106行貨*|功能 原裝,慧穎生物提供COA質(zhì)檢報告以及其他相關(guān)資料,充足干冰運輸,當(dāng)日或次日發(fā)貨。
胎牛血清功能:
1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2. 提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
7.內(nèi)毒素極低,其次無菌過濾,后三次為0.1um無菌過濾處理。
8.進行細菌、真菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測,符合動物協(xié)會要求
9.建議使用范圍:科研使用,細胞培養(yǎng)
10.儲存:-20℃凍存,避免反復(fù)凍融,4°C保存不超過1個月。反復(fù)凍融會破壞血清中有效成 分,影響血清品質(zhì)。
胎牛血清、小牛血清、新生牛血清之間的區(qū)別:
1、采血時間不同:
胎牛血清(Fetal Bovine Serum)是在母牛懷孕5-8個月時,通過胎牛心臟穿刺采血獲取的血清。新生牛血清(Newborn Calf Serum)是來自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。小牛血清(Calf Serum)采自出生后2周至1年內(nèi)的小牛靜脈取血。
2、組份與比例不同:
兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎發(fā)育所必需的生長因子。一些生長因子到胎牛10個月時就消失了。
3、用途與用法不同:
某些細胞必需胎牛血清才能生長,而有些細胞只需小牛血清即可。使用濃度一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時,推薦我們總結(jié)出來的三步法(見下表),可預(yù)防沉淀發(fā)生。不推薦血清4℃過夜融化,更不能直接將冷凍的血清放入37℃水浴或者溫箱中。因為血清在融化時,蛋白先融,冰塊后融,局部蛋白濃度過高,易發(fā)生沉淀。血清在解凍后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
關(guān)于細胞培養(yǎng)中的“黑膠蟲”:
在細胞培養(yǎng)中常可見到培養(yǎng)液中出現(xiàn)大小不等、形態(tài)不同的黑色顆粒。只要這種黑色顆粒一出現(xiàn),我們的細胞不是停止生長就是陸續(xù)死亡。人們常稱這種顆粒為「黑膠蟲」。聽說,這種黑色顆粒還會「游動」?小編想想都雞皮疙瘩掉一地。難道真的是細胞長蟲子了嗎?
關(guān)于「黑膠蟲」的傳說:
① 分類
關(guān)于「黑膠蟲」的分類,學(xué)術(shù)界沒有明確給予說法。
1. 部分認為黑膠蟲污染是微生物感染,但是沒把它歸為某種特定的生物類型,目前「黑膠蟲」尚屬一種未知生物。根據(jù)中國病毒所和軍科院的鑒定,這可能是一種寄生于牛血清內(nèi)的原蟲,似乎和草履蟲和變形蟲有類似之處,但是由于課題經(jīng)費不夠而不能繼續(xù)下去,終也沒有有力證明黑膠蟲是否為原蟲;
2. 同時,另一部分學(xué)者不認為所謂的「黑膠蟲」是一種生物污染,而認為是細胞碎片,是在細胞培養(yǎng)時由于細胞凋亡或死亡產(chǎn)生的;
3. 此外,還有學(xué)者認為「黑膠蟲」是玻璃瓶中類似氧化硅的物質(zhì)。
② 形態(tài)
直徑約 0.5-1 μm,顯微鏡觀察為黑色,線狀、桿狀或橢圓形,不同人員觀察到的形態(tài)不一致。
③ 運動
顯微鏡下有典型的布朗運動(不規(guī)則的原地小距離抖動),即很多細胞培養(yǎng)者看到的,像黑色的小蟲游來游去。但是在物理學(xué)上來說,只要顆粒足夠小,即可在液體中呈布朗運動,因此,呈「布朗運動」并不足以說明「黑膠蟲」為生物體。
④ 抗性
耐高溫高壓,抗細菌和抗霉菌的藥物對「黑膠蟲」無效,可以保守的判定「黑膠蟲」不屬于細菌、霉菌。
⑤ 環(huán)境
可存在于細胞培養(yǎng)基中,可隨細胞傳代存在。
關(guān)于「黑膠蟲」的猜測
① 細胞碎片
隨著細胞培養(yǎng)的繼續(xù),部分細胞開始衰亡,細胞膜結(jié)構(gòu)破裂,破裂之后的細胞內(nèi)容物泄露到培養(yǎng)液中。尤其是溶酶體的破壞,連續(xù)性地造成其他細胞和細胞器的損傷,如果換液不很勤,又會出現(xiàn)進一步破壞和殘渣的出現(xiàn)。 假設(shè),這種黑點是某種生物,其大小及運動狀況達到了用顯微鏡可以觀察出的程度,那么其營養(yǎng)代謝和能量需求也就可想而知,培養(yǎng)液中的養(yǎng)分消耗、酸堿含量程度等都應(yīng)發(fā)生明顯變化。然而,并沒有報道指出這些狀況出現(xiàn)在在所謂的「黑膠蟲」感染過程中,也沒有有力證據(jù)指出這種黑點的出現(xiàn)會對細胞狀態(tài)產(chǎn)生直接影響。當(dāng)細胞狀態(tài)下降時,一些學(xué)者觀察到黑點明顯增多,這很有可能是細胞狀態(tài)下降時,細胞衰亡產(chǎn)生的細胞碎片。
② 氧化硅類似物
有報道稱,這種黑點其實不是一種生物,是無機物,其本質(zhì)是玻璃培養(yǎng)瓶里的硅顆粒,會在一定程度上影響細胞生長。細胞狀態(tài)好時,不明顯;細胞狀態(tài)較差、數(shù)量較少時才容易看到,因此建議使用一次性培養(yǎng)瓶。
③ 支原體
有人曾認為這種黑點可能是支原體污染,理由是它通過濾膜,但已有充分的證據(jù)顯示它并不是支原體:
1. 這種黑點光鏡下可見,支原體在光鏡下不可見。
2. 這種黑點在多種染色后可見,HOECHST 即能將它染色,而支原體用普通染色法不易著色,姬姆薩染色淺,革蘭染色為陰性。因此,「黑膠蟲」是支原體的可能性很小。
④ 寄生蟲原蟲
有人認為這種黑點屬于寄生類的原蟲,在 400 倍以上的高倍鏡下可以清楚的看到這種黑點有兩種不同形態(tài),一種較大,運動較慢;另一種較小,運動較快;個體小分布在大的周圍。同時,這種黑點的存在不依賴于活細胞。有人做過這樣的試驗,單純培養(yǎng)有黑點污染的血清,直到滿視野遍布大小不一的黑點。據(jù)說,病毒所和軍科院曾開展過相關(guān)研究,然而由于課題經(jīng)費不足沒有繼續(xù)進行,目前,并沒有明確的證據(jù)顯示這種黑點為原蟲。
解析
從前面關(guān)于這種神秘的黑點的描述可以看出,人們遇到的黑點其實并不一樣,有像細胞碎片的、有像氧化硅的、有像支原體的、有像原蟲的等等。目前,國內(nèi)各實驗室環(huán)境、器材條件參差不齊,實驗人員的操作質(zhì)量也不盡相同,很多人發(fā)現(xiàn)細胞被細菌污染了,不好處理,而卻描述出來的現(xiàn)象和流傳的「黑膠蟲」類似,一傳十,十傳百,「黑膠蟲」被傳說的變得越來越神秘,對「黑膠蟲」的描述也五花八門,眾口不一。很多實驗人員細胞培養(yǎng)失敗,就會把失敗的原因歸結(jié)為有的黒膠蟲污染。其實,黑膠蟲是否存在,還有待于科學(xué)的發(fā)展。但有一點可以肯定的,大部分人發(fā)現(xiàn)的「黒膠蟲」并不是真正那個未知的黒膠蟲,而是常見的細菌、真菌、原蟲等微生物污染。
報道
在《細胞生物學(xué)雜志》中《對細胞培養(yǎng)中一種黑色運動顆粒性質(zhì)的研究》論文,文中經(jīng)過多種實驗驗證后指出:「在組織培養(yǎng)中常觀察到一種大小不等、形態(tài)不同的黑色運動顆粒,它對培養(yǎng)細胞的生長有不良影響,有時甚至導(dǎo)致細胞死亡,并能在一定條件下隨培養(yǎng)時間的增長而增加其數(shù)量。人們常稱這種顆粒為黑膠蟲或中毒顆粒,我們?nèi)〖毎囵B(yǎng)用的血清、培養(yǎng)基和其他材料中的黑色運動顆粒,應(yīng)用光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、掃描電鏡對其形態(tài)學(xué)進行系統(tǒng)觀察;并用顯微攝影觀察其活動情況;用紫外分光及電泳透析進行生化分析
結(jié)果證明:該顆粒為無膜式結(jié)構(gòu),無蛋白質(zhì)成分,中性環(huán)境下帶正電荷,能譜掃描電鏡分析為硅復(fù)合物,我們稱之為硅小體,證明其活動屬布朗運動。本文進一步用電感耦合等離子發(fā)射光譜分析了培養(yǎng)液及雙蒸水中可溶性的硅含量在不同質(zhì)量的容器及不同時間的變化,證明了硅小體的增多主要來源于培養(yǎng)液對玻璃器皿的侵蝕,或來源于被培養(yǎng)的細胞。
綜上所述,不管是黑膠蟲到底是什么物質(zhì),選擇一款高品質(zhì)的胎牛血清會避免這種情況的一大半,如何選購高質(zhì)量胎牛血清:
市場上的胎牛血清種類繁多,魚龍混雜,很多科研工作者,特別是剛接觸細胞培養(yǎng)的人,難以分辨胎牛血清質(zhì)量的優(yōu)劣。選購胎牛血清請注意以下幾點:
一、外觀
拿到胎牛血清,先接觸的是血清外觀,對于缺少細胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人來說,外觀的判斷尤為重要
1、顏色
根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國的細胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,這個指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
國產(chǎn)血清的采血點很分散,大多是由屠戶采血后馬上離心收集,所以很少會有溶血,表現(xiàn)出明亮的蠟黃色,當(dāng)然,國產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛血清。
進口胎牛血清或多或少總有點溶血,因為真正的胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂。
2、沉淀
很多血清客戶,會發(fā)現(xiàn)進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問題,這是沒有根據(jù)的。
血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對血清質(zhì)量沒有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。
國產(chǎn)的血清,大多來自北方,由于價格低廉,保存環(huán)境都不好,從采血、冷凍、運輸?shù)缴a(chǎn)會經(jīng)過多次凍融,每次凍融過程,就會析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,很少有沉淀產(chǎn)生。
進口的胎牛血清,過濾分裝前很少會反復(fù)凍融,生產(chǎn)后的成品也是清澈的,但隨著時間的推移,血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉淀。當(dāng)然,進口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,生產(chǎn)后血清可能會渾濁,甚至有大量沉淀。
當(dāng)然,購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),使用時需要融化,融化過程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進行,否則沉淀相對較多,雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。
3、澄清度
進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡,而國產(chǎn)血清,因為絕大多數(shù)是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,這對于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進行對比,可容易分辨。
二、主要技術(shù)指標(biāo)
目前國內(nèi)血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是2005版的《中華人民共和國藥典》,主要指標(biāo)有以下幾點:
1、內(nèi)毒素
標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml。內(nèi)毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)一系列過程中的無菌操作情況。
2、總蛋白含量
胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說明采血的牛齡偏大,不是胎牛,數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。
3、血紅蛋白
標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高,反之,數(shù)值越低。
4、pH
國產(chǎn)血清,大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來初步鑒別血清的來源。
5、微生物
包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。隨著國內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經(jīng)過0.1um過濾,大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴(yán)重的,主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入,又無法過濾,很難*清除,但對血清質(zhì)量影響不大。病原性病毒,特別是BVDV,在國產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而進口胎牛血清中基本都控制的很好。
6、免疫球蛋白
國產(chǎn)血清的只是定性檢測,結(jié)果也很不準(zhǔn)確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數(shù)值能*體現(xiàn)出采血的時的牛齡情況,國產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。
7、其它
不管是國產(chǎn)還是進口血清,都是不測抗生素的(無四環(huán)素胎牛血清除外)。國外,抗生素的使用很嚴(yán)格,用量也很少,每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國內(nèi),抗生素的濫用已成了普遍現(xiàn)象,血清中殘留很高,對細胞培養(yǎng)極為不利,這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。
10099-141胎牛血清相關(guān)主要產(chǎn)品如下:
Gibco胎牛血清FBS 10270-106 SOUTH AMERICA 500ML
Gibco優(yōu)等胎牛血清FBS 10437-028 Mexico 500ML
Gibco優(yōu)等胎牛血清FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML
Gibco特級胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML
Gibco特級胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML
Gibco特級胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML
Gibco優(yōu)等胎牛血清FBS 10091-148 New Zealand 500ML
Gibco優(yōu)等胎牛血清FBS 26140-079 USA 500ML
Gibco熱滅活胎牛血清FBS heat inactivated 10082-147 USA 500ML
Gibco熱滅活胎牛血清FBS heat inactivated 10100-147 AUSTRALIA 500ML
Gibco超低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS 16250-078 USA 500ML
Gibco透析胎牛血清Dialyzed FBS 264000-044 USA 500ML
Gibco活性炭/葡聚糖處理胎牛血清Charcoal Stripped FBS 12676-029 USA 500Ml
Gibco新生牛血清New born calf serum 16010159 New Zealand 500ML
Gibco馬血清Horse Serum 16050-122 New Zealand 500ML
Gibco熱滅活馬血清Heat-Inactivated Horse Serum 26050-088 New Zealand 500Ml
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