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Raw264.7細(xì)胞,小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 傳代說明

發(fā)布時間:2019-06-26瀏覽:2069次

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標(biāo)題:Raw264.7細(xì)胞,小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞    傳代說明

細(xì)胞名稱:Raw264.7小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞

貨號:M003

種屬:小鼠

細(xì)胞來源:從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進

生長特性:貼壁 部分懸浮  圓形

培養(yǎng)條件:培養(yǎng)基:DMEM(H)+10%FBS(推薦使用HAKATA優(yōu)等胎牛血清HN-FBS-50)

溫度:37℃    

氣相:95%空氣,5%二氧化碳

傳代說明:

1.用75%酒精噴灑整個培養(yǎng)瓶消毒,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行1-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養(yǎng)液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基(以T25培養(yǎng)瓶為例)并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代,一般2到3天換一次液;

2.待細(xì)胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行傳代,傳代比例為1:3到1:8;

3傳代步驟:將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°預(yù)熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,往培養(yǎng)瓶中加入3-5 ml PBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1-2 ml預(yù)熱好的胰酶,置于37°孵育消化(次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細(xì)胞脫落為*消化時間,記錄*消化時間,以便于下次消化),消化好后加入3ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后收集細(xì)胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,進行傳代。

保存說明:

凍存條件:80%*培養(yǎng)基+10%FBS+10%DMSO

(備注:建議使用本公司的冷凍液(H-W-100),用4度保存的冷凍液直接重懸細(xì)胞,不能預(yù)熱后使用。)

保存條件:液氮存儲

常見問題說明:

1.培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞極大可能會污染,所以我們會及時安排幫老師解決。

2.收到細(xì)胞后盡快更換為含 10%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加 10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間zui長不宜超過 72 小時)

3.細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。1-2小時后觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,留8-10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。

 

供應(yīng)商:慧穎細(xì)胞庫 人源均來自于第三方str鑒定,請放心購買

供應(yīng)限制:僅供科研使用

 

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SUER1253(XR)    HT55細(xì)胞,腺癌細(xì)胞  1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1254(XR)    HTK-細(xì)胞,漿細(xì)胞骨髓瘤  1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1255(XR)    HuCCT1細(xì)胞,    1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1256(XR)    HuG1-N細(xì)胞,    1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1257(XR)    huH-1細(xì)胞,肝癌細(xì)胞 1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1258(XR)    HuH28細(xì)胞, 1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1259(XR)    HuH-6細(xì)胞,肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞   1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1260(XR)    HuH-7細(xì)胞,肝癌細(xì)胞 1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1261(XR)    HuNS1細(xì)胞, 1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1262(XR)    HUP-T3細(xì)胞,    1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1263(XR)    HUP-T4細(xì)胞,    1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1264(XR)    HuT 102細(xì)胞,霉菌病fungoides-Sezary綜合癥細(xì)胞  1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1939(XR)  NCM460細(xì)胞  1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1940(XR)  NHEK細(xì)胞,正常人皮膚角質(zhì)細(xì)胞    1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1941(XR)  SH-EP1細(xì)胞,神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞    1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1942(XR)  SGC7901/ADR細(xì)胞 1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1943(XR)  TA-K細(xì)胞,人甲狀腺未分化癌細(xì)胞  1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1944(XR)  TAM-1細(xì)胞,人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞 1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1945(XR)  NHBE細(xì)胞,人正常支氣管上皮細(xì)胞  1×106  1ml/T25 詢價/元

 

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