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LOVO細胞| LOVO細胞系 培養(yǎng)步驟
產品名稱:LOVO細胞
中文名稱:人結腸癌細胞;LOVO
規(guī)格:T25
形態(tài)特征:上皮樣
生長狀態(tài):貼壁生長
特征特性:LoVo建自1971年,從診斷為結腸腺癌的56歲男性白人的一個轉移到左鎖骨上區(qū)的腫瘤結節(jié)建系。癌基因C-myc,K-ras,H-ras,N-ras,Myb,sis和fos的表達呈陽性。癌基因N-myc的表達未做檢測。它在裸鼠中能成瘤。與107細胞聯(lián)合皮下接種5只裸鼠21天后全部成瘤。表達腫瘤特異的核基質蛋白蛋白CC-3和CC-4。
培養(yǎng)條件:F12K+10%FBS(推薦HAKATA優(yōu)等胎牛血清 貨號:HN-FBS-500)
傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次
凍存條件:HAKATA ® 無血清細胞凍存液 貨號:H-W-100 規(guī)格:100ML
支原體檢測:陰性
使用權限:A類
參考文獻:Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11,13,14;D13S317:8,11;D16S539:9,12;D18S51:13,18;D19S433:14,15;D21S11:29,31.2;D2S1338:17,18;D3S1358:14,OL;D5S818:11,13;D7S820:10,11;D8S1179:10;FGA:18,20;TH01:9.3;TPOX:8,9;vWA:17,18;
供應商:上?;鄯f生物科技有限公司
復蘇周期:10個工作日左右
培養(yǎng)步驟:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內,嚴格無菌操作;將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。
2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內,嚴格無菌操作;將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。
慧穎生物是一家專業(yè)從事細胞培養(yǎng)相關產品的公司,擁有獨立細胞房(可隨時約定參觀),供應胎牛血清,無血清細胞凍存液,無血清培養(yǎng)基,常規(guī)培養(yǎng)基,胰酶,雙抗,*培養(yǎng)基,STR鑒定細胞,感受態(tài)細胞等,專業(yè),專注,性價比高,是您Shou選之家。
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貨號 簡稱 中文名稱 培養(yǎng)條件 特性 形態(tài)
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