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C6細胞大鼠腦膠質(zhì)瘤 操作說明

發(fā)布時間:2016-02-16瀏覽:1853次

C6細胞大鼠腦膠質(zhì)瘤 操作說明

C6細胞簡介:

產(chǎn)品名稱:C6細胞

中文名稱:大鼠腦膠質(zhì)瘤

來源:大鼠腦 膠質(zhì)瘤細胞

細胞形態(tài):上皮樣

生長狀態(tài):貼壁生長

培養(yǎng)基:DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件:37℃ 5% CO2

消化條件:0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA 溶液,消化 5-10min

傳代比例:1:2-1:3

換液時間:2-3 天換液一次

凍存液比例:85%培養(yǎng)基,10%FBS, 5% (v/v) DMSO

凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存

C6細胞大鼠腦膠質(zhì)瘤 操作說明

懸浮生長細胞的傳代:直接直接吸去或離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細胞,1:3或1:5稀釋細胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

 

貼壁生長細胞的傳代:吸去培養(yǎng)液,用PBS洗滌細胞一次,加入消化液,在37℃中消化約3~10分鐘,待細胞開始脫落時,倒去消化液,加入新鮮培養(yǎng)液,懸浮和吹打分散細胞。也可以待細胞*消化脫落,500×g離心5分鐘,去除消化液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細胞。1:3或1:5稀釋細胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

2)細胞株的凍存:

1. 取培養(yǎng)2~3天生長旺盛的細胞,用細胞培養(yǎng)液將細胞配成2×106~2×107/ml。

2. 在1ml細胞凍存管中加入0.5ml細胞懸液,0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亞砜(或甘油),混勻后密封。置4℃ 1小時,-20℃ 2小時,然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上隔夜后浸入液氮中。

3)細胞株的復(fù)蘇:復(fù)蘇時,從液氮中取出凍存管,立即置37℃水浴中融化細胞。將細胞直接加入10ml含15%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中,置37℃ 5%CO2飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。懸浮細胞待細胞全部沉降后小心吸去上清液,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng);帖壁細胞則培養(yǎng)2~3小時,待細胞帖壁后,倒去培養(yǎng)液,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。也可以在加入新鮮培養(yǎng)液以后,500×g離心5分鐘,去上清液,加入新鮮培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。

素爾生物一站式血清采購商城,供應(yīng)各類品牌胎牛血清,主要品牌:SERANA、BOVOGEN、Hyclone、Gibco、PAA、Sigma、BI等.

以Hyclone為例,主要供應(yīng)的血清主要有:

SV30087.02  500ML   南美源  適合一般細胞,普通腫瘤細胞

SH30084.03  500ML   澳洲源  適合嬌貴細胞的培養(yǎng)

SH30396.03  500ML   加拿大  適合嬌貴細胞的培養(yǎng)

SH30070.03  500ML   北美    適合嬌貴及干細胞

SH30071.03  500ML   北美    優(yōu)等級別

SH30370.03  500ML   北美    標準型

SH30406.02  500ML   新西蘭  適合一般細胞,普通腫瘤細胞

SH30406.02M 500ML   新西蘭  干細胞

SH30084.03M 500ML   澳洲源  干細胞

SH30406.02E 500ML   新西蘭  胚胎干細胞

SH30084.03E 500ML   澳洲源  胚胎干細胞

SH30070.03E (帶紅色標簽)  500ML   北美    干細胞

SH30068.03  500ML   美國    碳吸附血清

SH30068.03HI    500ML   美國    碳吸附,滅活

SH30118.03  500ML   北美    新生牛

SH30074.03  500ML   美國    馬血清

SH30074.03HI    500ML   美國    熱滅活馬血清

 

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