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HL-7702【HL-7702】細(xì)胞常見問題 1:
液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好?還是冷凍好?
答:要冷藏??!因?yàn)橐后w培養(yǎng)基冷凍后再化凍時(shí),其溶液的pH值會(huì)發(fā)生改變,溶液往往變堿,某些成分溶解也會(huì)受到影響,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個(gè)月~一年。
HL-7702【HL-7702】細(xì)胞常見問題 2:
培養(yǎng)液pH對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響有哪些?
答:由于大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2~7.4,偏離此范圍對(duì)細(xì)胞將產(chǎn)生不良的影響。各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不*相同,原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受差,無(wú)限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。
但總體來(lái)說,細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些,偏酸環(huán)境中更利于細(xì)胞生長(zhǎng)。因此,我們?cè)谂渲婆囵B(yǎng)用液時(shí),可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些。培養(yǎng)基在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時(shí),溶液的pH還會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右。
HL-7702【HL-7702】細(xì)胞常見問題3:
細(xì)胞傳代消化時(shí)所用胰酶濃度越高越好嗎?
答:不見得!因?yàn)橐鹊鞍酌溉芤旱南芰κ呛腿芤旱膒H、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關(guān)。通常情況下,pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力zui強(qiáng)。另外,鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。
培養(yǎng)細(xì)胞每次進(jìn)行傳代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反復(fù)沖洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶,以便于將含血清的培養(yǎng)基沖洗干凈,這樣就能大大提高消化液的消化能力。
細(xì)胞中心通常使用的消化液濃度為:
(1)0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;
(2)0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA。
(3)0.25% 胰蛋白酶
溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制。
多數(shù)細(xì)胞傳代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA這種消化液。
HL-7702【HL-7702】細(xì)胞常見問題4:
培養(yǎng)細(xì)胞狀態(tài)欠佳原因有哪些:
答:1、 培養(yǎng)基的新鮮程度:一般加入血清后的*培養(yǎng)基,2周內(nèi)用完。否則血清有效成分失活,影響細(xì)胞培養(yǎng)。
建議:*培養(yǎng)基一次不要配太多,200ml以下?;蚋鶕?jù)用量決定。
2、 細(xì)胞外源微生物的污染:細(xì)胞不宜長(zhǎng)期體外培養(yǎng),因?yàn)橥庠次⑸镂廴镜膸茁蚀蟠筇岣?。易發(fā)現(xiàn)和難發(fā)現(xiàn)的。影響細(xì)胞狀態(tài)。
建議:實(shí)驗(yàn)前凍存一批細(xì)胞,隔幾個(gè)月重新復(fù)蘇。即保證實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞代數(shù)一致,又將外源污染的后果降到zui低。
3、 排除其他原因:如更換培養(yǎng)條件(血清、培養(yǎng)基等);使用器皿的潔凈程度;
Calu-1細(xì)胞株【Calu-1】細(xì)胞價(jià)格
SPC-A-1細(xì)胞株【SPC-A-1】細(xì)胞價(jià)格
A-427細(xì)胞株 【A-427】細(xì)胞價(jià)格
MSTO-211H細(xì)胞株 【MSTO-211H】細(xì)胞價(jià)格
SK-MES-1細(xì)胞株 【SK-MES-1】細(xì)胞價(jià)格
NCI-H1703細(xì)胞株 【NCI-H1703】細(xì)胞價(jià)格
NCI-H2170細(xì)胞株 【NCI-H2170】細(xì)胞價(jià)格
NCI-H226細(xì)胞株 【NCI-H226】細(xì)胞價(jià)格
NCI-H520細(xì)胞株 【NCI-H520】細(xì)胞價(jià)格
Calu-6細(xì)胞株 【Calu-6】細(xì)胞價(jià)格
HLF-a細(xì)胞株 【HLF-a】細(xì)胞價(jià)格
Calu-3細(xì)胞株 【Calu-3】細(xì)胞價(jià)格
LTEP-a-2細(xì)胞株 【LTEP-a-2】細(xì)胞價(jià)格
NCI-H1395細(xì)胞株 【NCI-H1395】細(xì)胞價(jià)格
NCI-H1975細(xì)胞株 【NCI-H1975】細(xì)胞價(jià)格
NCI-H441細(xì)胞株 【NCI-H441】細(xì)胞價(jià)格
NCI-H596細(xì)胞株 【NCI-H596】細(xì)胞價(jià)格
BEL-7402細(xì)胞株 【BEL-7402】細(xì)胞價(jià)格
Hep G2細(xì)胞株 【Hep G2】細(xì)胞價(jià)格
HuH-7細(xì)胞株 【HuH-7】細(xì)胞價(jià)格
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QGY-7701細(xì)胞株 【QGY-7701】細(xì)胞價(jià)格
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SMMC-7721細(xì)胞株 【SMMC-7721】細(xì)胞價(jià)格
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HA細(xì)胞株【HA】細(xì)胞價(jià)格
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