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告別2015,迎接2016年,春節(jié)過(guò)去了,天氣也越來(lái)越熱起來(lái),那么越是到炎熱的時(shí)候,越是聽(tīng)到實(shí)驗(yàn)室老師的埋怨,細(xì)胞總是污染,我該怎么辦?現(xiàn)在慧穎細(xì)胞庫(kù)技術(shù)來(lái)幫各位老師分析下原因,以及解決辦法。
細(xì)胞污染可能原因:
1.天氣太熱,實(shí)驗(yàn)者在培養(yǎng)和接種或者換液時(shí)出汗(有空調(diào)稍好,但是手也出汗)。
2.培養(yǎng)間里可能暗藏污染原。
3.注意培養(yǎng)箱(這點(diǎn)zui重要),仔細(xì)檢查培養(yǎng)箱里的隔板的下面,有可能有霉菌斑。(我以前遇到過(guò))
4.培養(yǎng)基污染多數(shù)是配置過(guò)程中造成的,仔細(xì)檢查配置過(guò)程用到的器具。
5.血清過(guò)期一個(gè)月,如果保存的好應(yīng)該沒(méi)有問(wèn)題,但是保存不好,新來(lái)的血清,用一次就可能污染。血清過(guò)期和污染是否有必然的不好說(shuō),我們覺(jué)得不大。
解決辦法:
1.*清潔培養(yǎng)間,顯微鏡室。然后,紫外燈多照射一端時(shí)間消毒空氣。
2.*清潔培養(yǎng)箱:(1)每個(gè)隔板仔細(xì)清洗,火烤。(2)培養(yǎng)箱大換水,換成新鮮干凈的蒸餾水。(3)培養(yǎng)箱內(nèi)壁用酒精棉球或者稀過(guò)氧乙酸認(rèn)真擦洗。(4)紫外燈長(zhǎng)時(shí)間照射(一天)。
3.實(shí)驗(yàn)用器械消毒:注意消毒時(shí)間和壓力,有必要檢查壓力鍋和校正壓力表是否準(zhǔn)確。
4.一次性手套在打開(kāi)使用前一天放入無(wú)菌間照射消毒。
5.如果用雙抗,應(yīng)該現(xiàn)用現(xiàn)配。
6.注意過(guò)濾器的消毒滅菌。
7.經(jīng)驗(yàn)告訴我們過(guò)期1年內(nèi)的血清,只要保存妥當(dāng),其實(shí)血清的效價(jià)是不會(huì)降低的;還有剛購(gòu)買(mǎi)的大規(guī)格的血清收到后,避免反復(fù)凍融,血清分裝的時(shí)候要無(wú)菌分裝,轉(zhuǎn)入無(wú)菌間,在超凈臺(tái)內(nèi)將血清分裝入50-100ml血清瓶中封口,并于-20℃保存?zhèn)溆?。分裝時(shí)注意:① 預(yù)先要將血清輕輕搖動(dòng)數(shù)周、混勻;② 用吸液管吹出血清時(shí)要注意:③ 不要吹出氣泡,血清很粘稠,很容易產(chǎn)生氣泡。如果產(chǎn)生氣泡,則在酒精燈火焰上過(guò)一下?;鄯f生物作為國(guó)內(nèi)幾大動(dòng)物血清供應(yīng)商之一,凡購(gòu)買(mǎi)我司血清,我們會(huì)按照老師要求規(guī)格免費(fèi)幫老師分裝好后凍存運(yùn)輸。
8.檢查培養(yǎng)間和超凈臺(tái)的通風(fēng)過(guò)濾網(wǎng),如果臟了,需要更換。
總之,潮濕悶熱天氣培養(yǎng)細(xì)胞非常容易污染,必須注意每一個(gè)環(huán)節(jié)。具體的可能造成污染的環(huán)節(jié),還得要自己體會(huì)查找。
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