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慧穎生物專業(yè)供應(yīng)人GOD試劑盒,葡萄糖氧化酶ELISA試劑盒;檢測目的:測量人血清、血漿、組織、細(xì)胞上清液等GOD含量水平的表達(dá)。 檢測方法:ELISA(雙抗一步夾心法)快速、精準(zhǔn)。 規(guī)格:48T/96T 試劑盒組成成分:微孔酶標(biāo)+標(biāo)準(zhǔn)品+樣本稀釋液+標(biāo)準(zhǔn)品+樣本稀釋液+檢測抗體-HRP+20×洗滌緩沖液+底物A 底物B+終止液+封板膜+說明書+自封袋 慧穎生物公司以信譽(yù)求發(fā)展,以品質(zhì)贏得信賴,自公司成立來,為大中院校、醫(yī)院、醫(yī)藥企業(yè)單位提供上百萬ELISA試劑盒,慧穎生物ELISA試劑盒指標(biāo)齊全,囊括1、細(xì)胞因子檢測試劑盒:2、肝纖維化檢測elisa試劑盒:3、心肌梗塞檢測elisa試劑盒 :4、內(nèi)分泌檢測elisa試劑盒:5、自身免疫檢測elisa試劑盒6、腫瘤標(biāo)志物檢測elisa試劑盒: 7、優(yōu)生優(yōu)育檢測elisa試劑盒:8、傳染病檢測elisa試劑盒141、特種蛋白檢測elisa試劑盒二、食品安全檢驗(yàn) elisa試劑盒:三、植物病毒、細(xì)菌、真菌、植物激素和轉(zhuǎn)基因作物的農(nóng)業(yè)診斷試劑盒四、動植物疾病診斷類如 豬、牛、羊、馬等家畜和禽類以及寵物類檢測試劑盒。本公司承諾,凡屬我公司試劑盒質(zhì)量問題,我們包退換,敬請老師們放心使用。全國統(tǒng)一訂購: ! 人GOD試劑盒,葡萄糖氧化酶ELISA試劑盒 詳細(xì)說明書(原理/樣本處理要求/操作步驟/注意事項(xiàng)/計(jì)算方法等) 檢測原理 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被葡萄糖氧化酶(GOD)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的葡萄糖氧化酶(GOD)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。 樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘 取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 自備物品 1. 酶標(biāo)儀(450nm) 2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3. 37℃恒溫箱 操作注意事項(xiàng) 1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。 2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。 3. 濃度為0 的S0 號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5 倍,zui終結(jié)果乘以5 才是樣本實(shí)際濃度。 4.嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。 5. 所有液體組分使用前充分搖勻。 試劑盒組成 名稱96孔配置48孔配置備注 微孔酶標(biāo)板12 孔×8 條12 孔×4 條無 標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL*6 管0.3mL*6 管無 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液6mL 3mL 無 樣本稀釋液6mL 3mL 無 檢測抗體-HRP 10mL 5mL 無 20×洗滌緩沖液25mL 15mL 按說明書進(jìn)行稀釋 底物A 6mL 3mL 無 底物B 6mL 3mL 無 終止液6mL 3mL 無 封板膜2 張2 張無 說明書1 份1 份無 自封袋1 個1 個無 注:標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S5)濃度依次為:0、0.5、1、2、4、8 ng/mL 試劑的準(zhǔn)備 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20 稀釋,即1 份的20×洗滌緩 沖液加19 份的蒸餾水。 洗板方法 1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min 后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5 次。 2. 自動洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5 次。 操作步驟 1. 從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。 2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔。標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL; 3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。 4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5 次(也可用洗板機(jī)洗板)。6. 每孔加入底物A、B 各50μL,37℃避光孵育15min。 7. 每孔加入終止液50μL,15min 內(nèi),在450nm 波長處測定各孔的 OD 值。 結(jié)果判斷 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel 工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD 值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。 試劑盒性能 1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值,大于等于0.9900。 2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于0.1 ng/mL。 3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。 4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。 5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。 6. 有效期:6 個月 免責(zé)聲明 1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。 2. 嚴(yán)格按照說明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
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