超低IgG胎牛血清：通過(guò)親和層析工藝去除胎牛血清中的γ球蛋白，

使FBS γ球蛋白含量減到zui低，一般IgG≤5ug/ml生物學(xué)活性不變。

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一、血清分類(lèi)：

胎牛血清、透析型胎牛血清 、超低IgG?胎牛血清 、干細(xì)胞培養(yǎng)胎牛血清 、特殊用途胎牛血清? 、活性炭/葡萄糖處理胎牛血清、胎牛血清替代物 、小牛血清 、新生?牛血清 、加強(qiáng)型小牛?血清 、補(bǔ)鐵小牛血清 、成牛血清 、供體?馬血清 、兔血清 、雞血清 、豬血清 、馬血清 、其他動(dòng)物?血清 、合成血清替代品?。

二、血清作用

牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份，具有極為重要的功能。

1. 提供能促使細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素、基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或含量微小的營(yíng)養(yǎng)物，以及某些低分子營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；
2. 提供結(jié)合蛋白，識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬離子，并與有毒金屬和熱源物質(zhì)結(jié)合，起解毒作用；
3. 是細(xì)胞貼壁、鋪展生長(zhǎng)所需因子的來(lái)源；
4. 起酸堿度緩沖液作用；
5. 提供蛋白酶抑制劑，細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受損傷。

三、血清保存注意事項(xiàng)：

(1)需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月.由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽?

(2)熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量.補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用, 平滑肌細(xì)胞收縮, 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺, 增強(qiáng)吞噬作用, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化.

(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀.

(4)一般廠商提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清.

(5)血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點(diǎn)":經(jīng)過(guò)熱處理過(guò)的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染.一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號(hào)的血清.

(6)切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì)破會(huì)而影響血清質(zhì)量.

四、血清常見(jiàn)問(wèn)題：

保存血清的方法血清應(yīng)保存在-5C至-2OC。然而，若存放于4C時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶，建議將無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損？

將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8C冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

如何避免沉淀物的產(chǎn)生

（1）解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。C至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20。C至37。C)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

（2）解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生

（3）請(qǐng)勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。

（4）血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。

（5）若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56。C，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?　欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。但不建議以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過(guò)濾膜。

何謂熱滅活?

一般是以56C，30分鐘來(lái)處理已解凍的血清，因?yàn)榇思訜岵襟E，可以使補(bǔ)體去活化，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。

有必要做熱滅活嗎?

實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或*沒(méi)有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多，這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察，像是 "小黑點(diǎn)"，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37C環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。

因此我們建議您，若非必須，您可以不需要做熱處理這一步。如此一來(lái)，不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間，更確保您血清的質(zhì)量!另外，購(gòu)買(mǎi)已滅活成品也不失一個(gè)捷徑，請(qǐng)?jiān)谫?gòu)買(mǎi)的時(shí)候注意詢問(wèn)廠家是否是已滅活血清。