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現(xiàn)貨Masson三色染色液染色原理:
Masson法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透性有關(guān)。組織的滲透性取決于組織的結(jié)構(gòu)密度。組織和細(xì)胞成分都是多孔的構(gòu)造,不同組織和細(xì)胞成分空隙大小不同,空隙大小決定組織滲透性。如空隙小,組織結(jié)構(gòu)致密,滲透性低,空隙大,組織結(jié)構(gòu)疏松,滲透性高。如已固定的組織用一系列陰離子水溶液染料先后或混合染色,則可發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞被zui小分子的陰離子染料著染,肌纖維與細(xì)胞質(zhì)等中等大小的陰離子染料著染,而膠原纖維則被大分子的陰離子染料著染,由此說明,根據(jù)組織不同的滲透性能,選擇分子大小不同的陰離子染料進(jìn)行染色,即可把不同組織成分顯示出來。染料分子大小取決于其分子量,小分子量者易于穿透結(jié)構(gòu)致密,滲透性低的組織,大分子只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松,滲透性高的組織,一般來說,疏松組織多選擇大分子染料,致密組織多選擇小分子染料,在masson染色中,麗春紅染肌纖維,亮綠染膠原纖維。臨床應(yīng)用:
1、如纖維瘤(肉瘤),平滑肌、橫紋肌瘤(肉瘤),神經(jīng)纖維瘤(肉瘤)、惡性纖維組織細(xì)胞瘤等,由于都含有大量的纖維,HE染色均為紅色。應(yīng)用Masson氏染色法,可將膠原纖維染色藍(lán)色或綠色,肌源性組織被染為紅色。
2、應(yīng)用與其他慢性炎癥的區(qū)別。
如慢性闌尾炎,疤痕愈合時(shí),纖維愈復(fù)病灶可被染為鮮紅色或藍(lán)綠色,SARS病患者愈合后有的肺部可出現(xiàn)疤痕,粘連,此時(shí)可顯示藍(lán)色或綠色。
現(xiàn)貨Masson三色染色液操作步驟
1. 石蠟切片脫蠟至水。
2. 鉻化處理或去汞鹽沉淀(甲醛固定的組織此步可略)。
3. 依次自來水和蒸餾水洗。
4. 用Regaud蘇木精染液或Weigert蘇木精液染核5-10min。
5. 充分水洗,如過染可鹽酸酒精分化。
6. 蒸餾水洗。
7. 用Masson 麗春紅酸性復(fù)紅液5-10min。
8. 以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
9. 1%磷鉬酸水溶液分化3-5min。
10. 不經(jīng)水洗,直接用苯胺藍(lán)或光綠液染5min。
11.以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
12.95%酒精、*、二甲苯透明、中性樹膠封固。
結(jié)果:膠原纖維、粘液、軟骨呈藍(lán)色(如光綠液染色為綠色),胞漿、肌肉、纖維素、神經(jīng)膠質(zhì)呈紅色,胞核黑藍(lán)色。
體會(huì)與說明:
1.控制好染色步驟。
2.組織固定起著很重要的作用,根據(jù)不同的固定液可延長(zhǎng)或縮短染色時(shí)間。
3.0.2%冰醋酸水溶液洗,可使色調(diào)清晰鮮艷。
4.磷鉬酸水溶液對(duì)麗春紅、酸性復(fù)紅有分化作用,分化時(shí)鏡下控制, 肌纖維和纖維素呈紅色,膠原纖維呈淡粉紅色即可。
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