L-929細胞，小鼠成纖維細胞

產(chǎn)品名稱：L-929細胞

中文名稱：小鼠成纖維細胞；小鼠結(jié)締組織L細胞株929克隆，

生長狀態(tài)：貼壁生長

形態(tài)特性：成纖維細胞

組織來源：組織：皮下結(jié)締組織；疏松結(jié)締組織及脂肪 品系：C3H/An

微生物及支原體檢測：陰性

細胞背景：1948年三月建立了NCTC clone 929(小鼠結(jié)締組織)，細胞系L的克隆。細胞系L是zui早建立的連續(xù)培養(yǎng)細胞系之一，而clone 929是zui早的克隆株。 從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的正常皮下疏松結(jié)締組織入脂肪組織中建立了親本細胞系L。 第95代的細胞系L使用毛細管法分離單細胞建立了clone929。 檢測發(fā)現(xiàn)鼠痘病毒陰性。

培養(yǎng)條件：MEM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號41500034，添加NaHCO3 1.5g/L，Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。

安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。

L-929細胞，小鼠成纖維細胞；“慧穎"提醒您收到細胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加*培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明，收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。注：1、觀察細胞在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，否則不能準(zhǔn)確判斷細胞的傳代密度?？醇毎男螒B(tài)請在10X或20X物鏡下。2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。3、有些細胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。4、收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與我們。..

L-929細胞，小鼠成纖維細胞，“慧穎"建議您胎牛血清使用GIBCO FBS-10099-141或HYCLONE FBS-SH30084.03，培養(yǎng)這個細胞，一定要用好的血清，這兩款貨號的血清素爾都可以提供，現(xiàn)貨，全程干冰運送，*，GIBCO 澳洲源優(yōu)等胎牛血清（貨號：10099-141）：http://www.chem17.com/st274540/product_19732281.html和HYCLONE 澳洲源優(yōu)等胎牛血清（貨號：SH30084.03）：http://www.chem17.com/st274540/product_19082965.html。凍存方法：凍存液：90%胎牛血清，10%DMSO，液氮儲存。

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