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上?;鄯f生物科技有限公司供應(yīng),我司作為細(xì)胞之源,細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)之家,擁有完善的細(xì)胞庫(kù)管理體系,供應(yīng)4000多種類細(xì)胞株細(xì)胞系,公司90%細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)人員有至少二十年的細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn),所售細(xì)胞狀態(tài)良好,活性高;公司供應(yīng)各類品牌胎牛血清,囊括:Gibco、Hyclone、SCL、BOVOGEN品牌血清,常備現(xiàn)貨,*,另有Hyclone和Gibco干粉培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基出售;Hyclone PBS緩沖液、雙抗、胰酶等,常備現(xiàn)貨。歡迎您致電咨詢!
人骨肉瘤細(xì)胞,HOS 簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱:人骨肉瘤細(xì)胞,HOS
分類:細(xì)胞株(系) > 人源性細(xì)胞系 > 骨,軟骨,肌肉
細(xì)胞背景:該細(xì)胞是從一名13歲的白人女性的骨肉瘤組織中分離建立的,表現(xiàn)為扁平形態(tài)、低飽和密度、軟瓊脂中的低克隆形成率和對(duì)化合物及病毒感染的敏感性。
培養(yǎng)條件:
1) 準(zhǔn)備MEM-EBSS培養(yǎng)基(MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)),90%, 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;1%NEAA。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
細(xì)胞特性:
1) 來源:骨
2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣
3) 含量:>1x106 個(gè)/mL
4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶
處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)隔夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)隔夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng):
1)收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
2)所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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