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您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品展示 > 細(xì)胞株 > 人腫瘤細(xì)胞株 > RWPE-1細(xì)胞株RWPE-1細(xì)胞價(jià)格
RWPE-1細(xì)胞株RWPE-1細(xì)胞價(jià)格 慧穎細(xì)胞庫(kù)提供傳代 凍存細(xì)胞,存活率高,*,復(fù)蘇周期短!慧穎提供400多種類細(xì)胞株細(xì)胞系、耐藥株、原代細(xì)胞、熱賣種類有:卵巢癌細(xì)胞、乳腺癌細(xì)胞、胃癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、前列腺、舌鱗癌細(xì)胞、結(jié)腸癌細(xì)胞等,: !
細(xì)胞介紹:RWPE-1細(xì)胞為人正常前列腺上皮細(xì)胞,來(lái)源于人正常前列腺,中文名為人正常前列腺上皮細(xì)胞,正常的細(xì)胞形態(tài)為上皮樣,貼壁生長(zhǎng)。腫瘤抑制基因: p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細(xì)胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的18(HPV-18)進(jìn)行轉(zhuǎn)化,建立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 細(xì)胞株 [PubMed: 9214605]. 在三維Matrigel培養(yǎng)時(shí),在雄激素作用下,RWPE-1細(xì)胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA。[PubMed: 11170142]. 當(dāng)與Matrigel或基質(zhì)細(xì)胞混合注射雄性裸鼠時(shí),RWPE。
培養(yǎng)基:這株細(xì)胞的基本培養(yǎng)基作為Invitrogen (GIBCO)提供的kit的部分: 角化細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基K-SFM,kit目錄號(hào)17005-042。隨kit提供這株細(xì)胞生長(zhǎng)所需的兩種添加劑(牛垂體提取物BPE及人重組表皮生長(zhǎng)因子EGF)。 配制*生長(zhǎng)培養(yǎng)基,需添加以下成分: 0.05 mg/ml BPE – 隨K-SFM提供 5 ng/ml EGF -隨K-SFM提供。K-SFM,BPE 0.05mg/ml,EGF 5ng/ml(Gibco試劑盒17005-042)。
培養(yǎng)條件:37℃ 5% CO2
消化條件:洗滌:不含Ca++/Mg++離子的D-PBS;消化:溶于D-PBS的0.05% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA溶液,消化5-10min,不能拍打培養(yǎng)皿, 需要靜止自然消化;中和:0.1% 大豆胰蛋白酶抑制子或含2%FBS的D-PBS;離心125×g, 5~7min
傳化比例:1:3-1:5
換液時(shí)間:2天換液一次
凍存液比例:85%培養(yǎng)基,10%FBS, 10% (v/v) DMSO
凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存
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SW 1990 SW 1990
慧穎運(yùn)輸:短途運(yùn)輸問(wèn)題不大??墒情L(zhǎng)途天熱時(shí),我們要做好相應(yīng)的運(yùn)輸安全措施?;罴?xì)胞的運(yùn)輸方法相對(duì)比較簡(jiǎn)單,a)將該瓶細(xì)胞裝滿培養(yǎng)基,這樣做的目的是讓所有細(xì)胞都始終有營(yíng)養(yǎng)供給。b)用酒精擦拭培養(yǎng)瓶,瓶口用封口膜包好。c)細(xì)胞取回后,半量換液。冬天則是采用全血清包被細(xì)胞運(yùn)輸,細(xì)胞運(yùn)輸中處于休眠狀態(tài),收到細(xì)胞以后,用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作;然后將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶,加入5ml左右含F(xiàn)BS的培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱隔夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞匯合度:若未超過(guò)80%匯合度,換液繼續(xù)培養(yǎng),根據(jù)情況傳代或者凍存。若超過(guò)80%匯合度,可直接進(jìn)行傳代。
對(duì)于RWPE-1細(xì)胞株RWPE-1細(xì)胞價(jià)格貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
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